Monoklonalne przeciwciała przeciwko ludzkiemu czynnikowi VII. Wykrywanie w osoczu drugiego białka antygenowo i genetycznie związanego z czynnikiem VII.

Kilka mysich monoklonalnych przeciwciał przeciwko ludzkiemu czynnikowi VII wytworzono przy użyciu technologii hybrydoma. Zastosowano dwa niekonkurencyjne przeciwciała monoklonalne do zbadania metodą Western blot materiału reaktywnego krzyżowo z czynnikiem VII (CRM) w normalnym ludzkim osoczu i trzech komercyjnie dostępnych plazmidach z niedoborem czynnika VII i skonstruowania łatwego sandwiczowego testu immunologicznego dla czynnika VII w osoczu. Druga, poprzednio nieopisana forma CRM czynnika VII została wykryta w ludzkim osoczu, który w analizie Western blot zabarwionej pozorną intensywnością 5-8% aktywności czynnika VII. Ta glikoproteina, wstępnie określana jako VII *, ma masę cząsteczkową 4500 D mniejszą niż czynnik VII, nie ma wykrywalnej aktywności funkcjonalnej czynnika VII, nie wiąże się z cytrynianem baru i nie jest rozpoznawana przez przeciwciało monoklonalne, które rozpoznaje czynnik VII, ale nie alfa-chymotrypsynę leczony czynnik VII. VII * nie został wytworzony proteolitycznie z czynnika VII podczas koagulacji in vitro lub po infuzji ludzkiego czynnika VII na króliki. Continue reading „Monoklonalne przeciwciała przeciwko ludzkiemu czynnikowi VII. Wykrywanie w osoczu drugiego białka antygenowo i genetycznie związanego z czynnikiem VII.”

Nienormalne postępowanie z hormonem przytarczyc: ROLA POBIERANIA PUBLICZNEGO I FILTRACJA GLOMERULARNA

Mechanizmy wychwytu parathormonu (PTH) przez nerkę badano u znieczulonych psów przed i po podwiązaniu moczowodu. Podczas ciągłego wlewu bydlęcego PTH (b-PTH 1-84), nerkowa różnica tętniczo-żylna (AV) dla immunoreaktywnego PTH (i-PTH) wynosiła 22 . 2%. Po podwiązaniu moczowodu i bez zmiany przepływu w osoczu nerki, AV i-PTH spadł do 15 . 1% (P <0,01), co wskazuje na ciągły i znaczący wychwyt i-PTH w miejscu peritubularnym i mniejszą rolę filtracji kłębuszkowej (GF) w wychwyt nerkowy i-PTH. Continue reading „Nienormalne postępowanie z hormonem przytarczyc: ROLA POBIERANIA PUBLICZNEGO I FILTRACJA GLOMERULARNA”

Hamowanie wydzielania parathormonu i niezależne od parathormonu obniżanie reabsorpcji kanalików wapnia przez WR-2721, unikalny środek hipokalcemiczny.

Hipokalcemię obserwowano u pacjentów otrzymujących WR-2721 kwas [S-, 2- (3-aminopropyloamino) – etylofosforotiolowy]. WR-2721 jest związkiem, który po defosforylacji zapewnia ochronę prawidłowych tkanek przed radio- i chemioterapią. Reakcji hipokalcemicznej towarzyszył spadek poziomu parathormonu (PTH) w osoczu oraz hipomagnezemia. Nasze obecne badania na szczurach dotyczące mechanizmu hipokalcemicznego działania WR-2721 wskazują, że: (a) Fosforylowana i defosforylowana postać WR-2721 indukuje równy zależny od dawki ubytek wapnia w osoczu. (b) U nienaruszonych szczurów maksymalna dawka hipokalcemiczna WR-2721 zmniejszała wydalanie cyklicznego AMP w moczu z 70,5 . Continue reading „Hamowanie wydzielania parathormonu i niezależne od parathormonu obniżanie reabsorpcji kanalików wapnia przez WR-2721, unikalny środek hipokalcemiczny.”

Kontrola cytokiny w anergii pasożytniczej w filariozie limfatycznym człowieka. Preferencyjna indukcja regulacyjnego limfocytu T pomocniczego typu 2.

Mechanizmy immunologiczne związane z utrzymaniem bezobjawowego stanu mikrofilarowego (MF) u pacjentów z filariozy limfatycznej pozostają niezdefiniowane. Pacjenci z MF mają upośledzoną proliferację limfocytów zależną od antygenu (Ag) i obniżoną częstość (Fo) limfocytów T specyficznych dla Ag, a mimo to podwyższone stężenie IgE w surowicy i przeciwciał przeciw pasożytniczych IgG4. Aby zbadać mechanizm anergii swoistej dla Ag u pacjentów z MF, w przeciwieństwie do pacjentów z przewlekłą niedrożnością limfatyczną (CP), Fc limfocytów specyficznych dla Ag z komórek jednojądrzastych krwi obwodowej wydzielających IL-4 lub IFN-gamma oceniano za pomocą filtra test immunoenzymatyczny na obecność enzymu, a poziomy transkryptu mRNA dla IL-10 i transformującego czynnika wzrostu beta (TGF-beta) oceniano za pomocą półilościowej techniki reakcji łańcuchowej polimerazy odwrotnej transkryptazy. Fo z limfocytów wydzielających IL-4 specyficznych dla filaria były równoważne w obu MF (średnia geometryczna [GM] = 1: 11,700) i CP (GM = 1: 29,300 P = 0,08), podczas gdy Fo wydzielania IFN-gamma limfocyty były niższe w MF (GM = 1: 39 300) niż w CP (GM = 1: 4200, P <0,01). Gdy zbadano stosunek komórek wydzielających IL-4 / IFN-gamma (T helper typ 2 [Th2] / Th1), osoby z MF wykazały dominującą odpowiedź Th2 (8: 1) w porównaniu z odpowiedzią Th1 u osobników CP (1 : 4). Continue reading „Kontrola cytokiny w anergii pasożytniczej w filariozie limfatycznym człowieka. Preferencyjna indukcja regulacyjnego limfocytu T pomocniczego typu 2.”

Katabolizm hemu in vivo: porównanie równoczesnej produkcji bilirubiny i tlenku węgla

Ilościową zależność między katabolizmem hemu i tworzeniem bilirubiny i tlenku węgla (CO) badano na nieleczonych szczurach i zwierzętach leczonych fenobarbitalem lub lekiem porfirogennym, alliloizopropyloacetamidem (AIA). Do oznaczania bilirubiny-14C i 14CO po podaniu hematyny-14C lub glicyny-14C wykorzystano nową komorę metaboliczną umożliwiającą ciągłe gromadzenie żółci i oddechu. Po dożylnym wlewie z hematyną-14C szczury kontrolne i szczury leczone fenobarbitalem wytworzyły równomolowe ilości znakowanej bilirubiny i CO; niewielka część podanej radioaktywności pojawiła się w żółci w innych metabolitach. Równomolową zależność w tworzeniu bilirubiny i CO zaobserwowano również po znakowaniu pulsacyjnym za pomocą glicyny-2-14C; u szczurów leczonych fenobarbitalem oba metabolity formowano ze zwiększoną szybkością w porównaniu do kontroli. W przeciwieństwie do tego, leczenie AIA zmniejszyło ułamkową konwersję hematyny-14C do bilirubiny i CO; znaczna część podanej radioaktywności pojawiła się w żółci w metabolitach innych niż bilirubina. Continue reading „Katabolizm hemu in vivo: porównanie równoczesnej produkcji bilirubiny i tlenku węgla”

Zmiany w metabolizmie hormonów tarczycy wywołane dietą podczas niedożywienia.

Zmiany w stężeniach hormonów tarczycy wywołane dietą stwierdzono w badaniach nad długoterminowym (7 mo) przekarmieniem u człowieka (badanie Vermonta). W tych badaniach dotyczących przyrostu masy ciała u ochotników o prawidłowej masie ciała, wymagane było zwiększenie liczby kalorii, aby utrzymać masę ciała po wzroście powyżej i powyżej wartości przewidywanej na podstawie zwiększonej wielkości. Było to związane ze zwiększeniem stężenia trijodotyroniny (T3). Nie stwierdzono zmiany zapotrzebowania kalorycznego na utrzymanie masy lub stężenia T3 po długotrwałym (3-miesięcznym) nadużywaniu tłuszczu. W badaniach nad krótkotrwałym przekarmieniem (3 tygodnie) stężenie T3 i klirens metaboliczny były podwyższone, co spowodowało wyraźny wzrost szybkości wytwarzania T3, niezależnie od składu nadkarmionej diety (węglowodany 29,6 +/- 2,1 do 54,0 +/- 3,3, tłuszcz 28,2 +/- 3,7 do 49,1 +/- 3,4, i białko 31,2 +/- 2,1 do 53,2 +/- 3,7 mikrogramów / d na 70 kg). Continue reading „Zmiany w metabolizmie hormonów tarczycy wywołane dietą podczas niedożywienia.”

Specyficzna korekcja zaburzonego wydzielania hydrolazy kwasowej w płytkach z niedoborem puli magazynowej przez difosforan adenozyny.

Płytki z niedoborami puli pamięci (SPD), które mają zmniejszone ilości składników gęstej granulki i / lub alfa-granulek, zawierają normalne ilości hydrolaz kwasu lizosomalnego, ale w niektórych przypadkach wykazują upośledzone wydzielanie tych enzymów. Zbadaliśmy tę upośledzoną odpowiedź sekrecyjną u pacjentów z SPD o różnym nasileniu niedoborów granulek i określiliśmy wpływ dodanych składników gęstoziarnistych. Wydzielanie kwaśnej hydrolazy było zaburzone u pacjentów z ciężkimi niedoborami granulek, ale nie u pacjentów z mniejszymi niedoborami granulek gęstych, w tym również z niedoborami alfa-granulek. Gdy składniki gęstej granulki (ADP, ATP, serotonina, Ca + 2, pirofosforan) dodano do płytek z filtrem żelowym, ADP, ale żaden z pozostałych składników, całkowicie nie korygował upośledzenia wydzielania trombiny i A23187 w płytkach SPD. Stężenie ADP wymagane do normalizacji wydzielania indukowanego przez trombinę było znacznie zróżnicowane, od 0,01 do 10 mikroM, u poszczególnych pacjentów. Continue reading „Specyficzna korekcja zaburzonego wydzielania hydrolazy kwasowej w płytkach z niedoborem puli magazynowej przez difosforan adenozyny.”

Biosynteza neurofizyny in vitro w raku owsa płuca z ektopową produkcją wazopresyny.

Włączenie znakowanych związków do neurofizin w przeszczepialnym ludzkim raku owsa płuca ektopowym wytwarzaniem wazopresyny badano in vitro. Neurophysiny w ekstraktach komórkowych i pożywkach inkubacyjnych izolowano metodą immunoprecypitacji i analizowano za pomocą elektroforezy na żelu poliakrylamidowym z dodecylosiarczanem sodu (SDS). Gdy komórki inkubowano z L- [35S] cysteiną przez 12 godzin, elektroforeza na żelu poliakryloamidowym z SDS z immunoprecypitatów z ekstraktu komórkowego i medium rozdzielono dwie postacie neurofizyn o pozornej masie cząsteczkowej 10 000 (10K) i 20 000 (20K). Obie formy [35S] -neuropiryny zostały całkowicie wyparte z immunoprecypitatów przez nadmiar ludzkiej neurofizyny. Inkubacja komórek za pomocą L- [35S] cysteiny i chlorowodorku D- [3H] -glukozaminy ujawniła, że glukozamina została wprowadzona do regionu 20K neurofizyny, ale nie do 10K. Continue reading „Biosynteza neurofizyny in vitro w raku owsa płuca z ektopową produkcją wazopresyny.”

Zwiększona aktywność czynnika Xa we krwi pacjentów bezobjawowych z wrodzonym niedoborem antytrombiny.

Wykazano, że obecność wrodzonego niedoboru antytrombiny predysponuje pacjentów do zakrzepicy żylnej. Wykorzystaliśmy test radioimmunologiczny z fragmentem protrombiny F1 + 2 do ilościowego oznaczenia aktywności czynnika Xa we krwi 22 bezobjawowych osób z tym zaburzeniem klinicznym nie otrzymującym leczenia przeciwzakrzepowego. Średni poziom F1 + 2 był znacząco podwyższony u tych pacjentów w porównaniu z normalnymi kontrolami (3,91 vs. 1,97 nM, P mniej niż 0,001). Stwierdzono, że zachowanie metaboliczne 131I-F1 + 2 jest podobne u pacjentów z niedoborem antytrombiny i u osób zdrowych. Continue reading „Zwiększona aktywność czynnika Xa we krwi pacjentów bezobjawowych z wrodzonym niedoborem antytrombiny.”

Regulacja produkcji kolagenu przez system a -Adrenergic

Hamowanie wytwarzania kolagenu przez zwiększenie cyklicznej (c) zawartości AMP w hodowanych komórkach badano względem układu a-adrenergicznego. Hodowane ludzkie płodowe fibroblasty płuc inkubowane przez 6 godzin z a-agonistami izoproterenolem lub epinefryną wytwarzają o 30% mniej kolagenu na komórkę niż w nieobecności hormonów. Aby zademonstrować, że. -Agonisty działają poprzez ich interakcję z receptorem a w celu stymulacji cyklazy adenylanowej w celu zwiększenia wewnątrzkomórkowej zawartości cAMP, d- i 1-izoproterenol inkubowano oddzielnie z hodowanymi komórkami. Jedynie 1-izoproterenol zwiększył wewnątrzkomórkowy cAMP i zmniejszył produkcję kolagenu. Continue reading „Regulacja produkcji kolagenu przez system a -Adrenergic”